植物组织中H 2 O 2 原位定位
2014 级硕士
姓名：杨小妮
学号：2014050320
班次：2 班 实验目的：测定不同生长状态下，植株不同部位的过氧化氢的原位定位。
实验原理：DAG全名二氨基联苯胺，在细胞中，过氧化氢在过氧化物酶等氧化酶作用下，释放氧，氧化二氨基联苯胺，产生棕褐色沉淀。利用这个反应，可以定性检测在植物组织特定部位是否有过氧化氢产生。
H 2 O 2
+ DAG（联苯二胺）→ 聚合物（棕色）
仪器和用具：真空泵，水浴锅，烘箱，镊子，四个小烧杯，白瓷盘。
试剂：DAG（有毒），95%乙醇，固定液。
材料：施肥的小青菜，未施肥的小青菜。
操作步骤：
1) 将叶片和根系清洗净擦干→分别放进pH=3.8的DAG中→抽真空10min（可重复1至2次）→取出在25℃下1h后观察→根系放入白瓷盘拍照 2) 叶片脱色：
将叶片转移至新的烧杯→加入95%乙醇→40℃放置脱色→拿出叶片至白瓷盘→放入固定液拍照。
实验结果：
如图，左边和中间分别是未施肥小青菜根系和施肥小青菜根系处理后的结果，右边的是未施肥小青菜根系作为空白对照。施肥与未施肥的根系均被染成棕色，可以看出未施肥的根系比施肥的颜色深，侧根比主根颜色深。
讨论与分析 实验结果不够明显，可能原因（1）根系与DAG没有充分反应，（2）根系没有洗干净混淆
颜色。叶片脱色温度过低且脱色时间不够，故导致在规定时间内叶片中的H 2 O 2 原位定位失败。
结果表明侧根中的H 2 O 2 比主根多，未施肥的比施肥的H 2 O 2 含量多。这是因为施肥会引起过氧化氢酶活性增强，导致H 2 O 2 减少，故与DAG反应后颜色较浅。
注意事项：
（1）DAG是有毒试剂，操作时要戴手套；实验做完后试剂回收。
