Rh阴性无偿献血者表型分布调查及意义研究

孔晓红

（新疆阿勒泰市地区阿勒泰地区中心血站，新疆 阿勒泰 836500）

在人类多态性血型系统中Rh血型系统较特殊，位居ABO血型系统之后。极易出现新生儿溶血病、溶血性输血反应等情况[1]。D抗原属于Rh系统中十分重要的抗原。红细胞表面存在D抗原，检测为Rh阳性，如不存在D抗原，检测为Rh阴性。献血者Rh表型和阴性频率经检测，形成并完善Rh稀有血型内容，针对同种抗体采取预防方法，有效的保证临床供血质量[2]。在相关研究中，针对稀有血型进行筛选，并建立相关满足阿勒泰地区的稀有血型库，进而将面临的稀有血型不足、不良输血反应等相关问题予以解决，将输血效果予以提升。

1.1 基本数据 在2019年1月-2020年1月期间选取127例Rh阴性无偿献血人员，其中男性患者有89例，女性患者有28例，年龄选自18-60岁，年龄均值为（48.54±2.15）岁。

1.2 方法

1.2.1 试剂为单克隆抗A抗B血型定型试剂、人ABO血型反定型为红细胞，使用上海血液生物制药有限公司生产的试剂；
RhD血型、ABO检测卡主要为长春博迅生物技术有限责任公司生产；
抗D（IgM/IgG）是加拿大Dominion公司生产和德国BIO公司生产；
抗c、抗C、抗e、抗E等单克隆抗体和多特异抗人球蛋白试剂均属于上海血液生物制药有限责任公司提供；
使用北京金豪制药股份有限公司生产的血型鉴定和不规则抗体筛查质控品。

1.2.2 仪器 使用湖南湘仪实验室仪器开发有限公司生产的cence TDZ5-WS仪器进行检测；
使用江苏新康医疗器械有限公司生产的37oC和56oC电热恒温水浴箱；
使用日本奥林巴斯生产的CHK型双目生物显微镜

1.2.3 检验方法 检测无偿献血者Rh血型：使用加拿大Dominion公司生产和德国BIO公司生产提供的抗-D，使用上海生物科技有限公司生产的抗-A、抗-B标准血清，抗-D、抗-C、抗-c、抗-E、抗-e以及抗人球蛋白；
使用cence湘仪TDZ5-WS离心机辅助检查。

表1 Rh阴性表型分析

筛选和确认RhD阴性：使用微量板盐水法初筛所有标本，需将浓度为3%的被检红细胞悬液与单克隆IgM抗-D试剂，离心使用平板离心机，观察离心结果，针对不凝集人群，将其判定为RhD阴性。阴性标本主要采取2种单克隆IgG抗-D试剂检测间接抗人球蛋白试验。在37oC下孵育半小时，将浓度为3%的50 u和100 u抗-D被检红细胞混合，并使用生理盐水对其进行洗涤4-5次，加入100 u抗人球蛋白，观察离心结果。对于凝集的患者确诊为弱D，对于不凝集的患者确认为IAT阴性[3]。

利用试管法对RhCcEe抗原检测：利用4支干净试管，并对其进行详细标记，分别为抗-C、抗-次、抗-E、抗-e，取1滴相应的抗血清试剂分别放在每个试管中，1滴被检人员的红细胞悬液，浓度为2%-5%，将其充分混匀，并采取及时处理，离心时间在15 s左右，重新悬浮细胞扣，观察凝集反应，红细胞凝集人员称为阳性，其红细胞中存在相应的抗原，针对红细胞不凝集人员，需在37oC之下对其进行孵育，孵育时间为15 min，并离心15 min，对其悬浮细胞扣凝集反应进行观察，如红细胞一直不凝集，定为阴性，证实无相应抗原存在，相反存在抗原。

1.3 判定指标 对其进行正规试验，有效的鉴定Rh阴性无偿献血者的表型，并使用微板法诊断RhD，使用间接抗球蛋白试验确认Rh（D）阴性确认试验。检测IAT，并明确RhD阴性情况，行常规血清学方法诊断，ABO血型、RhCcEe抗原情况。

200 例Rh阴性无偿献血人员，其中60例ABO血型中包含16例A型（26.67%）、19例B型（31.67%）、17例O型（28.33%）、8例AB型（13.33%）；
13例RhCcEe表型包含6例ccdee型（46.15%）、3例Ccdee型（23.08%）、2例ccdEe型（15.38%）、1例CCdee型（7.69%）、1例CcdEe型（7.69%）。见表1。

Rh血型系统存在D、C、c、E、e抗原，其中免疫原性较强的抗原为D，RhD抗原需依照表位数量和质量进行不同区分，主要表现为正常、D弱、D部分、D、DEL。其中DEL、弱D等均可造成免疫应答，进而出现同种抗-D，对供者的Rh血型进行准确测定，将同种免疫予以避免[4]。

Rh血型研究逐渐加深，Rh表型属于基因分型技术，与血清学分型比较，其优点为操作简单，不需要采取特殊仪器和设备，在输血前检查工作中具有重要意义。Rh表型检测的最终结果为制定合适的输血方法，对献血者定型检测时，需使用不同来源的抗-D试剂，尽最大可能检验出弱D抗原，防止Rh阴性受血者摄入此类血液。

综上所述，在输液工作中，对Rh阴性献血者血清学表型进行有效调查，防止出现相应的溶血反应，将血液供需矛盾予以解决，为临床用血提供有效证据。