刘倩
【摘要】目的：探讨分析在ABO疑难血型鉴定中采用吸收放散试验及抗体增强方法检测的效果。方法：研究时间为2020年2月—2022年2月，在电脑所编辑的随机抽选程序作用下在上述所涉及的这段时间内，将实施ABO血型正反定型均不符合的血液标本35例作为本次研究的探讨对象，对其通过使用不规则抗体筛查、抗体增强方式、吸收反射法以及直接抗人球蛋白的相关试验进行检测，对患者最终的血型抗原以及血清中抗体的检测结果进行观察与分析。结果：在ABO血型正反定型不相符合的22例患者之中，所出现的A抗原减弱、B抗原减弱以及AB抗原减弱的患者分別有14例、5例和3例；
其中，所存在的A亚型和B亚型的患者数量分别为3例和2例。在表现为ABO血型抗体效价降低的7例患者之中，其中表现为A型血的患者其血清之中所含有的B抗体效价降低这一情况的患者有2例，在表现为B型血的患者之中其血清所含有的抗A抗体效价出现了降低的患者有3例，表现为O型血的患者之中，对其血清进行检测，最终显示出发生了抗B及抗AB抗体效价降低这一情况的患者有2例。结论：临床所使用的吸收放散试验能够发挥出浓缩血清以及初步纯化抗体的效果，所使用的抗体增强检验方式能够使得低效价的血清抗体所拥有的凝集强度得到增加，在所开展的输血相容性的检测工作之中联合使用ABO正反定型、吸收放散试验以及抗体增强，通过这样的检测形式，能够让临床所开展的ABO疑难血型鉴定工作更加准确，并且能够对临床所存在的部分较差配血不合的现象进行良好的解决。
【关键词】ABO；
疑难血型鉴定；
吸收放散试验；
抗体增强
The effect of absorption and elution test and antibody enhancement method in ABO difficult blood group identification
LIU Qian
PKU Care Luzhong Hospital， Zibo， Shandong 255400， China
【Abstract】Objective：To explore and analyze the effect of absorption and elution test and antibody enhancement method in the identification of ABO difficult blood types.Methods：The study time was from February 2020 to February 2022，respectively，under the influence of the random selection procedure edited by the computer，35 blood samples that did not conform to the positive and negative typing of ABO blood group were taken as the research object of this study，through the use of irregular antibody screening，antibody enhancement method，absorption reflection method and direct anti-human globulin related tests too bserve and analyze the final blood group antigen and the detection results of antibodies in serum.Results：Among 22 patients who did not conform to the positive and negative typing of ABO blood group，there were 14 patients with weakened A antigen，5 patients with weakened B antigen and 3 patients with weakened AB antigen；
Among them，the number of patients with subtype A and subtype B was 3 and 2，respectively.Among 7 patients with decreased ABO blood group antibody titer，among them，2 patients with type A blood showed a decrease in the titer of B antibody contained in their serum，among the patients with type B blood，the titer of anti-A antibody in their serum decreased in 3 cases，among the patients with type O blood，the serum test finally showed that the titer of anti-B and anti-AB antibodies decreased in 2 cases.Conclusion：The clinical absorption and elution test can exert the effect of concentrating serum and preliminary purifying antibody，the antibody enhancement test can the agglutination strength of low titer serum antibodies，the combination of ABO positive and negative typing，absorption test and antibody enhancement in the blood transfusion compatibility test can make the clinical ABO difficult blood type identification work more accurate，and can solve some clinical phenomena of poor blood matching incompatibility.
【Key Words】ABO；
Difficult blood type identification；
Absorption and elution test；
Antibody enhancement
ABO血型是临床上针对实施输血相容性检测工作之中必须检验的一个项目，开展该项指标的监测是为了保证临床输血治疗的安全性以及有效性，所以临床实施的ABO血型鉴定工作的准确性是保证输血治疗的安全性的重要前提条件以及重要的措施[1]。吸收放散试验是现阶段输血相容性检测工作之中较为准确的一种方式，但是在实际工作过程中发现吸收放散试验对表现为低效价血清标本实施检测的过程中，其所拥有的凝集强度相对较弱，并且检测的时间较长，操作非常复杂。
1.1 一般资料
研究时间为2020年2月—2022年2月，在电脑所编辑的随机抽选程序作用下在上述所涉及的这段时间内，将实施ABO血型正反定型均不符合的血液标本35例作为本次研究的探讨对象，对其通过使用不规则抗体筛查、抗体增强方式、吸收反射法以及直接抗人球蛋白的相关试验进行检测，在参与本次研究的所有患者之中存在的ABO血型抗原减弱16例、ABO亚型6例、ABO血型抗体效价降低7例、高效价冷凝集素6例，其中男21例，女14例，年龄25～75岁，平均年龄（50.21±2.36）岁。对患者的各项基线资料进行相互之间的比较，不具备差异性（P>0.05）。
1.2 方法
1.2.1 吸收放散试验 针对于实施微柱凝胶法ABO血型正反定型最终检测结果不相符的血液标本，对其实施吸收反射试验，针对于患者红细胞表面ABO血型抗原以及血清之中的抗A以及抗B抗体进行相应的检测。在所涉及的被检测血清之中加入A型或者是B型试剂红细胞；
在被检测的红细胞之中加入对应的人源抗A或者是B血清，在此之后让其放置在温度设定为4℃的冰箱之间进行为期2～4h的吸收，每间隔15min的时间对其进行1次振摇，对于红细胞则需要使用生理盐水进行洗涤，频次控制在5～6次，压积红细胞需要按照1：1的水平比例在其中加入相应的生理盐水，将其放置在温度为56℃的水之中完成10min的水浴放散，在使用离心机离心之后将该标本的上清液取出，加入1滴试剂红细胞悬液，在完成离心之后使用肉眼或者在显微镜下完成相应的结果观察。
1.2.2 抗体增强方法 对于临床所使用的常规盐水试管法作用下，在实施立即离心操作之后没有出现凝集反应的低效价血清，通过将反应时间延长、增加离心的次数以及增加血清量或者是置换血清以及将其放置在温度为4℃的冰箱之中，时间控制在15min，在此之后再试试离心并观察相应的结果。血清置换法：需要将被检测的血清与试剂红细胞产生反应并实施离心操作之后将最终标本的上层血清倒掉，之后需要在其中加入被检测的血清，并实施离心操作之后对最终的结果进行观察，通过这样的操作进行对血清的反复置换，频次控制在2～3次，通过增强与试剂红细胞所结合的抗体数量的方式使得凝集强度得到有效的增加。
1.3 观察指标
对患者最终的血型抗原以及血清中抗体的检测结果进行观察与分析。
1.4 统计学方法
采用SPSS 24.0统计学软件进行数据分析。计数资料采用（%）表示，进行x2检验，计量资料采用（x±s）表示，进行t检验，P<0.05为差异具有统计学意义。
2.1 ABO血型抗原减弱及亚型的检测结果
在ABO血型正反定型不相符合的22例患者之中，所出现的A抗原减弱、B抗原减弱以及AB抗原减弱的患者分别有14例、5例和3例；
其中，所存在的A亚型和B亚型的患者数量分别为3例和2例。所测定的ABO血型抗原减弱的凝集强度表现为MF～1+，对于患者的红细胞所开展的吸收放散试验，其所表现出的凝集强度从MF～1+增长到了2+～3+的水平状态。在所含有的3例A亚型患者的血清之中检测出来IgM型抗A不规则抗体，在所涉及到的表现为B亚型的2例患者的血清标本之中能够检测出IgM型抗B不规则抗体。
2.2 ABO血型抗体效价降低的检测结果
在表现为ABO血型抗体效价降低的7例患者之中，其中表现为A型血的患者其血清之中所含有的B抗体效价降低这一情况的患者有2例，在表现为B型血的患者之中其血清所含有的抗A抗体效价出现了降低的患者有3例，表现为O型血的患者之中，对其血清进行检测，最终显示出发生了抗B及抗AB抗体效价降低这一情况的患者有2例。对于出现抗体效价降低这一情况的患者而言，常规情况下会通过使用反定型凝集强度MF～1+w，通过使用抗体增强这一方式反定型使得其所拥有的凝集强度得到增加，增加的凝集强度需要达到1+及以上，最高至（1+w）～2+的水平。
在临床所开展的ABO血型鉴定过程之中，主要使用的方式为定型试剂血清检测红细胞上所含有的抗原和通过使用试剂红细胞对血清之中抗体的正反定型进行相应地检测，从而对患者的ABO血型情况进行更为准确地鉴定，在常规的情况下都需要符合正反定型的相关标准才能确定患者的ABO血型[2]。临床上一般情况下其ABO血型红细胞抗原所拥有的凝集强度都处于3+～4+的范围内，若其所拥有的凝集强度没有超过2+的水平，则这种情况的产生可能是患者出现疾病相关的ABO血型抗原减弱或者是因为患者出现了基因突变的相关情况。所以，在临床上针对于ABO血型所开展的鉴定工作可能会发生正反定型均与标准不匹配的情况，从而影响最终的监测结果给临床所开展的输血治疗带来一定的困难[3]。
在本次研究过程中，使用吸收放散试验以及抗体增强方法对所涉及的35例疑难血型患者的血液标本进行鉴定，将可能会对结果造成影响的因素进行排除，从而更为准确地确定出患者的ABO血型。吸收放散试验实施的主要原理是因为所含有的血清抗体与之相应的红细胞抗原之间在合适的条件下会出现结合效应，但是这种效应的产生是不可逆的，将某些物理条件改变的时候，血清抗体又会从相应的结合红细胞之上脱离下来，在通过临床已知的抗原红细胞实施相应的特异性鉴定工作[4]。出现了血型抗原减弱情况的血液标本在实施ABO血型鉴定的过程之中可能会出现正反定型不相匹配的情况，从而没有办法对患者的血型进行正确地判断，需要通过使用吸收放散试验实施相应的鉴定工作，使得弱抗原的凝集强度能够得到增加，能够与 ABO血型正反定型相匹配。在实际临床所开展的检验工作过程中发现吸收放散试验在对低效价的血清抗体标本进行检测的时候，放散液与试剂红细胞所拥有的凝集强度相对更弱，并且实际的各项操作更加繁杂，需要耗费更多的检测时间。所以，在实施常规方法反定型凝集强度相对更弱的低效价的血清标本实施检测的过程之中，需要先将反应的时间进行一定程度的延长、离心的次数增加以及增加血清量和将其放置在温度为40℃的冰箱之中进行为期10～15min的反应，之后再实施离心并完成相应的观察[5]。
综上所述，临床所使用的吸收放散试验能够发挥出浓缩血清以及初步纯化抗体的效果，所使用的抗体增强检验方式能够使得低效价的血清抗体所拥有的凝集强度得到增加，在所开展的输血相容性的检测工作之中联合使用ABO正反定型、吸收放散试验以及抗体增强，通过这样的检测形式，能够让临床所开展的ABO疑难血型鉴定工作更加准确，并且能够对临床所存在的部分较差配血不合的现象进行改善。
参考文献
[1] 胡志涛.吸收放散试验及抗体增强方法在173例ABO疑难血型鉴定中的应用研究[J].临床医药文献电子杂志，2020，7（18）：131.
[2] 张勤，闫烨，王丽娜，等.两种放散试验联合检测在新生儿ABO溶血病诊断中的应用效果[J].临床医学研究与实践，2021，6（4）：118-120.
[3] 邓俊，黄蓉，刘凤霞，等.自身抗体影响血型鉴定的处理方法及效果[J].中国输血杂志，2021，34（8）：818-820.
[4] 赵鼎铭，曲执.全自动血型分析仪与微板法在ABO血型筛查中的应用效果[J].中国医药指南，2022，20（25）：126-128.
[5] 张玉静.ABO血型鉴定及抗体筛查用于自身免疫性溶血性贫血（AIHA）患者中的研究[J].当代医学，2020，26（1）：162-163.
