材料与方法
2.1 主要仪器
实验主要用到的仪器有：液相色谱仪（waters 600-996二极管阵列检测器）、紫外可见分光光度计（岛津 UV-2450）、超声波清洗器（DL-120B）、高速台式离心机（TDL-100）、旋转蒸发仪（Heidolph-4000型号）、周转式振荡器（MSI）以及0.45μm的有机微孔滤膜。
2.2 试验试剂
实验主要用到的试剂有：氯霉素标准物质（纯度≥98.5%）、乙腈（色谱纯）、甲醇（色谱纯）以及由实验室自制的超纯水。
2.3 标准溶液配制
精密称取氯霉素标准品50mg并置于50mL容量瓶中，然后用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，配制成浓度为1.0mg/L的储备液，贮存于4℃冰箱中。储备液待使用时再配制成相应浓度的溶液。
2.4 牛奶试样配制
选用牛奶为待检测食品，将一定量的氯霉素标准储备液添加到不含氯霉素的牛奶样品中，分别配制成1.0mg/L、2.0mg/L、5.0mg/L和10.0 mg/L 的供试样品。
2.5 供试样品提取
精密吸取牛奶供试样品10.00mL，置于离心管中，加入乙腈定容，涡旋振荡1min后，超声提取10min。然后以5000 r/min的转速离心10min，移取上清液至100mL蒸发瓶中，重复提取2次，合并上清液，上清液使用旋转蒸发仪于35℃旋转蒸发至近干，用甲醇定容至5.0mL，经0.45μm有机滤膜过滤，试液供液相测定。
3 实验结果讨论
3.1 液相色谱条件的建立
取氯霉素标准储备液进行相应的稀释，然后在紫外分光光度计上扫描石英比色皿。由试验分析可以看出，氯霉素在278 nm处有吸收峰，故选择氯霉素检测波长为278nm。
液相色谱条件为：色谱柱采用岛津Shim-Pack VP-ODS（150.0×4.6 mm，5μm）；流动相为甲醇-水溶液（体积比为40∶60），流速1.0mL/min；波长278nm；柱温30℃；进样量10μL。
3.2 标准曲线的绘制
取一定量的标准储备液并稀释成质量浓度分别为1mg/L、5mg/L、10mg/L、15mg/L、20mg/L、25mg/L以及30 mg/L的标准系列溶液。经过计算可知，在1～30mg/L的范围内，氯霉素标准曲线的回归方程为Y=0.2027X+0.4474，相关系数r2=0.9994。
3.3 方法回收率与精密度
按第3节所述进行牛奶的供试样品提取，测定氯霉素含量并计算回收率，每个水平进行3次重复试验，结果见表1。
由表1可知，样品平均回收率在85.67%～98.20%的范围内，RSD为2.81%～8.76%。
4 结语
采用液相色谱法检测食品中的氯霉素残留具有快速、准确的特点，并且在氯霉素检测中得到了广泛的应用。而为了实现更加高效精确的检测，还需要相关技术人员作更进一步的研究和努力。
参考文献
[1] 张杰，许家胜，刘连利.高效液相色谱法测定牛奶中的氯霉素残留[J].化学研究与应用，2013（4）：593-595.
