断奶仔猪猪瘟单针免疫的临床应用及效果分析

张聚民，卞苏舒，苏 鹏，高连军

(1.杭州市临安区畜牧农机发展中心，杭州 临安 311300；
2.杭州市临安区河桥动物疫病诊疗所)

猪对猪瘟病毒(CSFV)具有较强的易感性[1]，无免疫力的猪群，一旦感染，通常引起大规模急性爆发，发病率和死亡率超过80%，损失十分严重[2]。全面实施疫苗免疫计划，能有效地控制猪瘟的大规模爆发流行，但散发流行依然存在，甚至出现局部爆发[3]。临安区规模猪场猪瘟一直实行程序化多次免疫，但即使这样，临床上慢性感染或非典型性感染也较为常见。在当前猪病防控形势下，探索猪瘟单针免疫而实现长久保护在生产上具有重要意义，为此，我们对断奶仔猪进行猪瘟单针免疫尝试，并测定其不同日龄免疫抗体水平，验证单针免疫的可行性。

1.1试验动物 选择临安区某猪场，该场生产整体稳定，猪瘟免疫长期使用国产同一品牌猪瘟细胞弱毒苗，近两年该场商品猪猪瘟二免抗体合格率80%以上，符合国家免疫要求，保育猪偶见持续慢性腹泻致僵现象。本试验猪选取父本为同一杜洛克公猪，母本为经产长加母猪，于2021年8月9日所产的4窝健康仔猪共52头作为试验基础群。

1.2试验设计 25日龄断奶，30日龄按公母比例相近，体重接近的原则从基础群选取仔猪40头分成两组，试验组和对照组各20头(表1)，空腹称重记录，采集血样2.5 mL/头，而后试验组和对照组分别注射1头份猪瘟弱毒苗(A)和2头份猪瘟弱毒苗(B)。于60日龄采血(2.5 mL/份)检测，采血后试验组注射生理盐水2 mL，对照组注射猪瘟疫苗(B)4头份(2 mL)；
于90日龄和180日龄分别采血检测，每份2.5 mL，并在180日龄两组空腹秤重。

试验组猪瘟疫苗(A)：江苏勃林格殷格翰生物制品有限公司生产，兽药生字101597550批号FC2020002，(C株，PK/WRL传代细胞源)。

对照组猪瘟疫苗(B): 某实业股份有限公司生物药厂生产，兽药生字140401115批号20201217，(细胞源)。

表1 试验分组

1.3试验环境及饲养管理 试验猪在同一育肥舍饲养，试验期间其饲喂方式、饲料种类、饲养密度、温度、通风等条件完全一致，每栏10头，密度0.83头/m2，温度在26-30 ℃之间，通风良好；
保育料喂至90日龄，而后改用育肥料至180日龄；
试验期间两组皆偶有腹泻、咳嗽，采用口服或注射方式药物治疗，预后良好；
除猪瘟免疫外其它免疫完全一致，其主要免疫有口蹄疫、伪狂犬、圆环病毒等。

1.4血样采集及免疫抗体检测 仔猪分别于30、60、90、180日龄时，用7 #采血器采集全血2.5 mL，离心分离血清，用ELISA方法检测猪瘟抗体。

猪瘟抗体判定标准：阳性PI≥0.4，阴性PI<0.4。

猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒：北京金诺百泰生物技术有限公司生产，批号20210208。

1.5统计分析 采用Excel软件整理试验数据，用SPSS软件进行单因素方差分析，P<0.05为差异显著。*代表P<0.05，**代表P<0.01，***代表P<0.001。

2.1免疫后仔猪体重变化监测与分析 30日龄的仔猪免疫前称重，并于免疫后150 d(即为180日龄)时再次称重，然后进行比较。试验结果表明试验组与对照组仔猪在30日龄和180日龄的平均体重均没有显著性差异(P>0.05)(图1)。通过对两组仔猪体重的变异系数分析显示，在180日龄时试验组仔猪体重的变异系数小于对照组，说明经过免疫后试验组仔猪群体体重均一度更高(表2)。

图1 不同日龄仔猪体重差异性分析

表2 不同日龄仔猪体重均匀度分析

2.2仔猪免疫后猪瘟抗体水平

2.2.1母源抗体 免疫前即30日龄时试验组与对照组仔猪猪瘟母源抗体PI值均小于0.4，抗体水平检测呈阴性，且试验组与对照组不存在显著性差异(P>0.05)，故试验母源抗体干扰差异性影响较小；

2.2.2免疫抗体水平 对两组仔猪进行猪瘟抗体水平的检测,结果表明在免疫后的各阶段试验组与对照组仔猪猪瘟抗体PI值均大于0.4，说明抗体水平检测皆呈阳性，但试验组抗体上升更快，高位平稳维持时间更长，且抗体平均水平试验组均明显高于对照组(图2)。同时在60日龄和90日龄时试验组抗体水平显著性高于对照组(P<0.001)；
但在180日龄时试验组与对照组抗体水平不存在显著性差异(P>0.05)(图3)。

图2 不同免疫组仔猪猪瘟抗体检测结果

图3 不同免疫组仔猪猪瘟抗体平均值加减标准差

2.2.3抗体的合格率和均一度 对两组仔猪免疫后抗体的合格率和均一度进行分析，结果表明试验组仔猪免疫后不同日龄抗体合格率均为100%，而对照组仔猪在60、90和180日龄时抗体合格率分别为80%、100%和90%；
此外试验组仔猪在60、90和180日龄时群体抗体水平的变异系数均明显小于对照组，从而说明试验组仔猪免疫后整体的抗体水平均一度较好，均维持在较高水平(表3)。

表3 不同免疫组仔猪猪瘟抗体合格率及均匀度

2.3经济效益分析 从表4可见综合人工成本因素，试验组相比对照组节约成本1.2元/头，对规模猪场而言使用单针免疫方法有较好地节约人工成本的效果。

表4 疫苗使用成本分析

猪瘟是影响生猪产业健康发展的重要疫病，预防该疾病的有效措施是接种疫苗，而抗体监测是评价疫苗接种效果的重要手段之一[4]。本研究结果显示仔猪30日龄时猪瘟抗体水平即为免疫前仔猪的母源抗体的水平，试验组和对照组合格率均为0，说明在30日龄时仔猪的母源抗体基本耗尽，不存在对本试验产生干扰。试验组与对照组免疫后猪瘟抗体合格率均高于国家要求的70%合格率，试验组单针免疫在60日龄时就可以使整体的合格率达到100%，且群体有很高的抗体整齐度。而对照组在60日龄时猪瘟抗体合格率为80%，未达到涂长春[5]提出的猪瘟群体免疫保护率高于85%时才能避免猪瘟发生的标准。对照组二次免疫之后即仔猪90日龄和180日龄抗体合格率分别为100%和90%，说明二次免疫与一次免疫相比,免疫效果有了明显的提升。而对于试验组的免疫疫苗，一次免疫后猪瘟抗体就可以达到理想的水平，且群体的抗体水平整齐度较高，说明对于猪瘟的防控来说，疫苗的选择非常重要，这与李满等[6]的研究结论一致。

本研究表明,选择合适的猪瘟疫苗对当前的猪场仅仅实施一次免疫即可使免疫猪群获得较高和整齐的免疫抗体水平,有效地防控猪瘟疫病的发生，同时也可减少免疫次数，降低人力成本和生物安全风险，这在生产实际中具有较大的推广意义。