无室间质评计划检验项目的实验室间比对

吕慧，林丽文，谢文坦，龙剑，覃文周

（贵港市人民医院检验科，广西 贵港 537100）

室间质量评价（External Quality Assessment，EQA）也称为能力验证（Proficiency Testing，PT），是临床实验室质量管理的重要方面。若EQA原料中的分析成分能够溯源到参考方法，那么依据EQA成绩就可以评估实验方法的准确度[1]。然而，由于资金、技术等多种原因的限制，许多实验室检测项目室间质量评价的覆盖率较低。根据本科室的实际情况，参照美国临床实验室标准化协会（CLSI）GP29-2A文件[2]，采用实验室间样本分割法对我室没有参加室间质量评价的检测项目——5"-核苷酸酶（5-NT）、胆碱酯酶（CHE）和β2-微球蛋白（β2-MG）三个项目进行比对，分析其在不同实验室检测结果的一致性。

1.1 仪器与试剂 我室日立公司生产的自动生化分析仪LABOSPECT 008 AS作为实验仪器，来宾市人民医院检验科罗氏cobas8000全自动生化分析仪作为比对仪器。我室采用的试剂生产厂家分别为：北京利德曼生化股份有限公司（5-NT）、浙江夸克生物科技有限公司（CHE）、西班牙Biosystems S.A.公司（β2-MG）；
参比医院使用的试剂厂家分别为：宁波美康生物科技有限公司（5-NT）、罗氏公司（CHE）、北京九强生物技术股份有限公司（β2-MG）。室内质控品均为朗道质控品。

1.2 样本采集 随机选取20份在线性范围内的高、中、低三个浓度无溶血、脂血的新鲜血清样本，每份临床样本分装成2份，每份1 mL。置-20oC冰箱保存，另一份标本干冰保存运送至来宾市人民医院检验科。标本测定前1 h取出复溶，混匀，按照1-20和20-1的编号顺序各测定一次，每个标本检测结果取两次结果的平均值，若两次检测结果偏差超过5%，则本次结果作废并重新测定。

1.3 质量控制 各检测项目按照各实验室的标准化操作规程进行检测，采用试剂配套校准品进行校准，室内质控随机插入检测标本进行检测，各检测项目室内质控均在控。

1.4 统计学分析 采用Microsoft Excel 2017软件处理实验数据。比对实验室的检测方法作为比对方法，检测结果为X；
我室的检测方法作为实验方法，检测的结果为Y。依照GP29-A2文件要求，将数据代入下述公式计算出来允许差异值，其中X）2，CVx是指比对方法室内质控的变异系数（CV），CVy则为实验方法Y的室内质控CV值。σ12=（CVxy×X）2，CVxy表示两个实验室间检测结果差值的CV，根据王薇等人的研究，我们设定实验室间的可变性CV%大约是为15%[3]，其将被作为临床上可接受的一致性。nx和ny分别为每台仪器重复检测的频数（本次研究为2）。α置信水平为0.95，Z1－α/2=1.96表示在1-α/2置信水平处正态分布的百分位数。取X±D作为上下限，若95%的标本Y（即至少有19个样本的测定结果）均落在X±D范围之内，则认为本实验室的检测结果与比对实验室检测结果的一致性可以接受。

2.1 本科室与来宾市人民医院检验科5-NT、CHE和β2-MG三个项目的室内质控情况 见表1。

2.2 以来宾市人民医院检验科检测的结果为X，以本科室检测的结果为Y，以X+D为上限，以X-D为下限做出散点图，5-NT、CHE、β2-MG三个项目的散点图如图1所示。CHE和5-NT所有的点均在X±D范围，除有一点检测结果在之X±D范围之外，其余点均在X±D范围内，即95%结果在区间内。CHE和5-NT这两个项目符合GP29-2A文件规定的标准，因此这两个测定项目检测结果在两个实验室间的一致性是可以接受的。而β2-MG散点图显示有9个点在X±D范围之外，即仅有55%结果在区间内，未满足GP29-2A文件的要求，我们判定β2-MG的测定结果在两个实验室间的一致性不被接受。

实验室间比对材料通常包括患者样本、相关质控品或者标准品。质控品在使用中往往存在一定的局限性，比如价格昂贵、有一定使用期限、性质不稳定、易变质等等，而且某些质控品与临床实际检测的样本存在一定的区别，因而不能完全反映标本的质量特征。使用患者样本则具有如下优点：它不依赖于常规的质量控制体系，而且能够较好地评估临床患者检测的分析前步骤，如样本采集、运输和处理等。另外，还可减少检测过程中的基质效应。对于比对的患者样本在保存及实验室间运输过程中，应注意保持其具有良好的稳定性，尽可能减少其额外变异。

本次实验比对结果显示，5-NT和CHE这两个项目检测结果在来宾市人民医院和本院实验室间的一致性可接受。而β2-MG只有55%检测结果结果在可信区间内，其检测结果在两实验室间的一致性不被接受，可能的原因：（1）两个实验室所用检测系统不同；
（2）虽然检测的方法一样，但是检测试剂并不出于同一厂家；
（3）标本的运输复溶等步骤的影响。若比对检测方法与实验检测方法的检测结果的一致性超出文件规定的可接受的范围，下一步我们应从以下几方面考虑：①更换操作人员对样本进行重新测定；
②考虑将样本上送至参考实验室进行检测；
③参考笫三方实验室的检测结果[4]。

表1 5-NT、CHE和β2-MG当月的室内质控情况

实验室间样本分割法方法是送样本的分割部分到其他实验室进行检测。然而分割样本只能评价实验室间的一致性及检测误差，但不能评价其正确度（如与参考测量程序进行比较后得到的偏倚），除非外部实验室使用校准的方法或参考方法或参考物质[5]。因此，要真正做好无室间质量评价计划检验项目的比对任重而道远。