【摘要】 目的 探讨活动性溃疡性结肠炎(UC)中血小板计数和一氧化氮(NO)的关系。方法 选取溃疡性结肠炎病例 173 例，根据Truelove 评分分为轻、中、重度，正常对照组 40 例，统计检测各组的血小板计数和一氧化氮水平。 结果 活动性UC患者血清一氧化氮水平及血小板计数明显增高，并与病情的轻重有关（P<0.05）。血小板计数、一氧化氮分别与溃疡性结肠炎的严重程度分级有关，并且二者呈正相关。结论 抑制NO在治疗活动性溃疡性结肠炎方面具有重要临床意义。
【关键词】 溃疡性结肠炎；血小板计数；一氧化氮水平
Ivestigation of Serum NO Levels andPlatelet Count in Patients With Ulcerative Colitis
【Abstract】 Objective To investigate the correlation between levels of serum nitric oxide and platelet count,immune dysfunction exists in patients with ulcerative colitis(UC).Methods 173 patients with UC were divided into 3 group: mild group,moderate group and severe group.40 health volunteers as control group,analysis of variance (ANOVA) on statistics or detections platelet count and serum NO of 4 groups.Results Levels of serum NO in patients with ulcerative colitis were significantly high and related to severe degrees of the disease.Conclusion Inhibiting undue NO is importantly significant to treat dysfunctional UC.
【Key words】 Ulcerative colitis;Platelet count;Nitric oxide
溃疡性结肠炎(UC)是一种病因未明的肠道非特性炎症,它的发病机制复杂 临床表现多样 实验检查多以 C反应蛋白增加、血沉加快、小细胞性血、中性粒细胞增高及血清白蛋白降低球蛋白高等进行评估 但临床上常可发现溃疡性结肠炎者血小板计数和NO含量明显增多 并且有研究证明溃疡性肠炎患者血液常呈高凝状态， 凝血以及纤溶系统常 ，内皮细胞损伤 ，使血小板激活， 可诱发全身性栓塞，NO参与了UC发生过程中的炎症和组织损伤。本研究对血小板计数与NO含量在溃疡性结肠炎中的相关性进行分析 并探讨其临床意义报告如下。
1 对象与方法
1.1 研究对象 选取包医二附院2008年1月至2010年7月确诊为溃疡性结肠炎(UC)的住院患者例所有病例均在院外或院内做过肠镜检查且符合2007年济南会议诊断标准［1］其中男87例,女86例，<20岁7例,21~30岁33例,31~40岁30例,41~60岁75 例,>60岁28例，平均年龄为（45.1±12.3）岁，病程为3 d~42年。病情程度：轻度组52例，中度组78例，重度组43例，正常对照组40例，男24例，女16例，年龄18~67岁，平均(44±5)岁，均无心脑血管疾病血液病史，也无吸烟史及服用抗血小板药物史，无感染、风湿病和肿瘤疾病。病例组和对照组的年龄性别差异无统计学意义。
1.2 仪器与检测
1.2.1 血小板计数 美国贝克曼库尔特有限公司(Beckman Coulter,Inc.)生产的 COULTER LH 750 全自动血细胞分析仪 ，取晨起空腹状态静脉血检测。
1.2.2 NO检测 采用中国军事医学科学院放射医学研究所提供的NO测试盒。取血清0.1 ml加0.6 ml0.15%ZnSO4混匀，加双蒸水0.4 ml，混匀，加0.1 ml4%NaOH，混匀，冰上孵育60 min，12000 r/min，离心2 min，取上清液0.6 ml加0.4 ml双蒸水及0.1 ml0.3%磺胺置冰上孵育15 min，之后加入0.1 mlD试剂（6 MM乙烯二胺盐酸盐），室温放置1 hr，545 nm比色，测A值，所得数据输入CASIOfx570AD计算器，模拟标准曲线，并算出各标本的实际含量。
1.3 统计学方法 运用 SPSS 13.0 医学统计软件 计量资料用(x±s)表示 组间均数差异比较采用方差分析；所得NO含量数据为偏态分布，先行对数转换，得出对数(x±s)后，再行反对数得出实际含量，并以(x±s)表示，采用t检验。
2 结果
2.1 UC组与正常对照组血小板计数比较结果见表1。正常对照组和轻度组比较 两组差异无统计学意义，P>0.05；UC 重度组血小板计数高于中度组，差异有统计学意义P<0.01；中度组血小板计数高于轻度组， 差异有统计学意义，P<0.01， 且重、中度组血小板计数均高于正常对照组，差异有统计学意义，P<0.01。
2.2 活动期患者病情程度与血清NO水平的关系 随病情加重血清中NO有增高趋势，重度明显高于轻度（t=10.88，P<0.01）和中度（t=11.32，P<0.01），但轻度与中度相比差异无统计学意义（t=1.69，P>0.05）。
2.3 不同病情血清NO水平与血小板计数的关系 轻度组血清NO与血小板计数进行相关性分析得出：血清NO水平与血小板计数的相关系数为0.38，t值为0.018，二者成正相关；中度组血清NO与血小板计数进行相关性分析得出：血清NO水平与血小板计数的相关系数为0.45，t值为0.004，二者成正相关；重度组血清NO与血小板计数进行相关性分析得出：血清NO水平与血小板计数的相关系数为0.46，t值为0.004，二者成正相关；血小板计数随着NO水平的升高而增加，病情越重，二者关系越明显。
3 讨论
传统多认为,包括溃疡性结肠炎与克罗恩病在内的炎症性肠病在中国属少见病，但近几十年来炎症性肠病的在亚洲的发病率日益增高，其中以溃疡性结肠炎患者为常见。有资料显示，亚洲该病患病率为4.0/10万~44.3/10万，中国推测UC的患病率为11.6/10万，且发病率和患病率有进一步增长的趋势，该病多病程缓慢，有反复发作的倾向，可导致严重的并发症，逐渐成为消化内科的常见疑难病。
溃疡性结肠炎的病因与发病机制尚未完全阐明，多数学者认为是由多种因素相互作用，主要包括感染、环境、免疫及遗传等因素。现代医学认为，溃疡的形成与致黏膜损伤因素和黏膜局部防御功能减弱有关。黏膜局部的血液循环是黏膜局部防卫能力的重要组成部分。良好的血液循环是提供丰富的营养和去除有害代谢物质的重要保证，对黏膜的完整性起重要作用［2］。血小板在UC发病中的作用引起人们的高度重视，已有研究证实在溃疡性结肠炎活动中存在血小板数升高，且可作为疾病活动程度指标［3］。文献报道，炎症性肠病患者血清NO浓度高于正常［4,5］，且与疾病活动呈正相关。本文与上述研究结果一致。
UC患者的肠黏膜存在粒细胞的浸润，浸润的粒细胞可产生强有力的炎症介导因子一氧化氮（NO）。本文NO水平非常显著的高于正常人，升高原因：结肠固有肌层中存在iNOS［6］，溃疡性结肠炎患者大肠区的内毒素诱导iNOS活性增强，还与炎性细胞因子如TNFα有关［7］。大量资料证实，在炎症初期，CNOS产生的少量NO可抑制血小板聚集，防止血栓形成。随着炎症发展，大剂量NO由iNOS催化产生，上述抑制作用减弱，促使血栓形成［8,9］。
血小板不仅在免疫方面而且在血栓形成方面发挥重要的作用，能够引起和/或持久维持IBD患者黏膜炎症，活化的血小板释放炎症介质与化学趋化物参与肠黏膜炎症反应，形成血栓阻塞肠黏膜循环，加重黏膜缺氧和损伤。活动性UC患者血清NO与血小板计数呈正相关，提示NO与血小板聚集、血栓形成存在关联，血小板与聚集和cGMP有关联，NO可能经cGMP依赖机制，抑制血小板粘附和聚集。NO使血小板中cGMP水平升高，导致胞浆内Ca2+暂时储存，从而降低胞内游离Ca2+浓度，使血小板不能聚集，调整血小板与血管壁间相互作用以维持血管内皮完整性，抑制血小板聚集，并使已聚集的血小板重新解聚；或抑制血小板在胶原纤维、内皮细胞基层及单层内皮细胞粘附；也可通过cGMP依赖机制与前列腺素协同抑制血小板聚集［10］。
研究报道，丹参注射液可明显抑制UC患者合成NO［11］，改善肠黏膜血液循环。故抑制iNOS产生大量NO可能是治疗UC的主要靶点之一［1214］，是治疗UC的一条有效途径。
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