母体血清MMP-9、PLGF联合LDH对重度子痫前期不良妊娠结局的预测

胡睿，王鑫鑫，郑芳秀

随着生活水平的提高，人们的生活习惯有了很大改变，妊娠期高血压疾病发病率逐年升高[1]。妊娠高血压疾病包括妊娠期高血压、子痫前期、子痫、慢性高血压并发子痫前期以及慢性高血压合并妊娠等[2]，是以血压升高、尿蛋白、水肿、全身脏器受损为临床表现的一种妊娠期特有的疾病，严重者极易出现抽搐即子痫。重度子痫前期是妊娠期高血压疾病的一种，对母婴健康产生严重威胁，也是造成围生儿死亡的主要原因[3-5]。终止妊娠时间与方式的选择直接对孕产妇及早产、死胎、流产以及畸形等围产儿不良结局产生直接影响。当前对重度子痫前期多以血压水平、血小板数量和并发症情况做综合判断，但检查比较复杂。因此，为了尽早对重度子痫前期患者进行妊娠结局预测，并进行有效干预,本研究选取80例妊娠期高血压疾病患者作为研究对象，探讨母体血清基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、胎盘生长因子(plasma placental growth factor,PLGF)联合乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)对重度子痫前期不良妊娠结局的预测分析，具体报告如下。

1.1 研究对象

选取2018年12月到2020年1月在南京医科大学附属常州妇幼保健院住院分娩的80例妊娠期高血压疾病患者作为研究对象，将其分为重度子痫前期组(n=34)和子痫前期组(n=46)，另取同期40例正常孕妇作为对照组。3组孕妇一般资料对比差异无统计学意义，详见下页表1。

表1 3组孕妇一般资料对比

纳入标准：重度子痫前期患者临床诊断收缩压≥160 mmHg和(或)舒张压≥110 mmHg、血小板减少(血小板<100×109/L)、肺水肿、新发生的中枢神经系统异常或者视觉障碍、肝功能损害(转氨酶水平大于正常值2倍以上)，严重者出现持续上腹或右上腹疼痛，不属其他疾病，或者两者均存在；
子痫前期患者妊娠20周之后出现收缩压≥140 mmHg和(或)舒张压≥90 mmHg，并同时出现尿蛋白≥0.3 g/24 h，或者随机尿蛋白(+)，血小板<100×109/L，转氨酶水平高于正常值2倍以上，血肌酐水平大于1.1 mg/dL或正常值2倍以上，出现肺水肿，出现视觉障碍或中枢神经系统异常；
妊娠期高血压患者在妊娠20周之前舒张压≥140 mmHg，收缩压≥90 mmHg或妊娠20周之后首次诊断高血压并持续到12周以上[6]。

排除标准：羊水过少及合并其他内科并发症；
临产产妇；
胎膜早破；
妊娠期感染性疾病；
妊娠期糖尿病；
多胎妊娠。

1.2 研究方法

搜集孕妇的病例资料进行回顾性分析，包括既往病史、流产史、初产与否、年龄、体质量指数、体重、多胎、孕周、生产结局、血清MMP-9、PLGF以及LDH指标等情况。

LDH检测方法：早晨空腹抽取上臂静脉血3 mL，分别置于标记无菌试管A、B中，分离血清(3 000 r/min，10 min)，离心半径3 cm。取上层血清。采用罗氏模块分析法(Roche modular analysis)E170全自动电化学发光免疫分析仪及其试剂盒检测A管中的血红蛋白。用全自动生化分析仪及其试剂盒检测B试管中LDH。所有操作严格按照要求进行。

血清MMP-9检测方法：禁食12 h后，早晨抽取空腹静脉血5 mL。在无菌试管中放置30 min后，以2 500 r/min离心15 min，将血清置于-70℃冰箱中。取血清后用ELISA法检测MMP-9水平。试剂盒由深圳市晶美生物工程有限公司提供，严格按照试剂盒说明书进行操作。

PLGF检测方法：采集孕妇外周静脉血1.5 mL，以3 500 r/min离心2 min，离心半径为200 px，于-20℃保存血清。测定前一天，将样品转移至4℃进行一次再溶解，当天将样品转移至室温(26℃)进行二次再溶解(0.5 h)。待血清完全溶解后，用移液枪将500 μL吸入量杯中等待检测。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清PLGF水平。试剂盒分别从武汉飞恩生物有限公司和上海酶联生物有限公司购买。

将34例重度子痫前期患者根据妊娠结局分为不良妊娠结局组(n=10)和良好妊娠结局组(n=24)，对比两组患者的基本资料与血清MMP-9、PLGF、LDH指标。

1.3 统计学方法

2.1 3组孕妇血清MMP-9、PLGF、LDH指标比较

3组孕妇母体血清MMP-9、PLGF、LDH指标差异有统计学意义(P<0.05)，详见表2。

表2 3组孕妇血清MMP-9、PLGF、LDH指标比较

2.2 3组孕妇不良妊娠结局分析

重度子痫前期组不良妊娠结局发生率为32.35%，子痫前期组为8.70%，对照组为2.50%，差异有统计学意义(P<0.05)，详见表3。

表3 3组孕妇不良妊娠结局分析(例)

2.3 不良妊娠结局组与良好妊娠结局组各指标水平比较

不良妊娠结局组与良好妊娠结局组孕妇年龄、体质量指数差异无统计学意义(P>0.05)，血清MMP-9、PLGF、LDH指标差异有统计学意义(P<0.05)，详见下页表4。

表4 不良妊娠结局组与良好妊娠结局组各指标水平比较

2.4 母体血清MMP-9、PLGF联合LDH对重度子痫前期不良妊娠结局的预测价值

对单因素分析差异有统计学意义的指标进行赋值：MMP-9≤0.32为1，>0.32为0；
PLGF≤0.80为1，>0.80为0；
体质量指数≥23.4为1，<23.4为0；
LDH≥363.23为1，<363.23为0；
年龄≥28为1，<28为1。结果显示MMP-9、PLGF与MMP-9、PLGF、LDH联合为重度子痫前期不良妊娠结局的影响因素(P<0.05)，详见下页表5。

表5 母体血清MMP-9、PLGF联合LDH对重度子痫前期不良妊娠结局的预测价值

重度子痫前期患者会出现尿蛋白、血压升高，全身不同程度的小血管痉挛，易导致胎盘着床较浅、血管内皮细胞损伤，出现多器官病理损伤，体内胎儿的生长受到限制，导致流产、死胎、畸形等不良妊娠结局[7]。该病的发病原因尚不明确，临床上尚缺乏有效的宫内干预手段，该病可能会导致胎儿早产相关并发症，因此重度子痫前期患者要尽可能延长胎龄，确保胎儿肺部尽量成熟，并选择合适时机终止妊娠[8]。相关研究显示，重度子痫前期患者伴有一定量凝血因子缺乏或者变异，从而导致高凝血状态，而且可能会发生微血管性溶血，其中主要表现为HELLP综合征、肝酶升高、血小板<100×109/L，充分反映了凝血功能损害严重与疾病的严重程度[9-10]。所以重度子痫前期患者的不良妊娠结局预测至关重要，本文选取母体血清MMP-9、PLGF、LDH指标，分析上述指标对重度子痫前期不良妊娠结局的预测价值。

本研究表明，3组孕妇母体血清MMP-9、PLGF、LDH指标差异有统计学意义。相关研究表明，重度子痫前期患者的MMP-9指标明显降低，其与LDH指标具有明显相关性[11-12]，本研究与之相符；
这主要是因为，MMP-9在妊娠期间的主要功能是酶降解作用，并促进滋养细胞侵入子宫内膜。LDH属于组织内糖酵解重要限速酶的一种，特异性与敏感性较高。当机体缺氧时，细胞内的无氧糖酵解作用增加，导致乳酸堆积，且LDH催化乳酸转变成丙酮酸的过程是可逆的，所以乳酸含量增加的同时LDH水平也会升高。而重度子痫前期患者组织缺血缺氧、全身小动脉痉挛，因而LDH水平相应升高。PLGF为二聚体糖蛋白，对于内皮细胞的分化和增殖、滋养细胞具有调节作用[13]，作用于血管内皮细胞时还可促进细胞分裂和分化，调节胎盘、胎儿血管生成和血管网重铸。由于PLGF与胎盘组织密切关联，临床上常将PLGF作为评估重度子痫前期危险程度的生化因子之一[14]。多项研究显示，重度子痫前期患者血清内PLGF水平低于正常孕妇[15-16]，本研究结果与之一致。原因在于PLGF表达降低会降低胎盘滋养细胞、血管内皮细胞的增殖、趋化过程，进而抑制胎盘、胎儿血管诱导生成过程，胎盘血管重塑障碍而诱发重度子痫前期。

本研究显示，重度子痫前期组患者不良妊娠结局发生率显著高于子痫前期组和对照组。周萍等[17]的研究表明，重度子痫前期患者不良妊娠结局高达29.59%，本研究结果与之相符。这也说明重度子痫前期患者的不良妊娠结局率比较高，因此对重度子痫前期患者妊娠结局进行预测具有重要价值；
研究结果表明不良妊娠结局组与良好妊娠结局组患者年龄、体质量指数差异无统计学意义，而血清MMP-9、PLGF、LDH指标差异有统计学意义。相关研究显示，PLGF表达降低会进一步加剧胎盘损伤，导致胎盘功能下降[18]。LDH属于肌肉、肾脏、心脏和肝脏等中均有分布的一种糖酵解酶，如果细胞出现损伤，机体会出现乳酸堆积现象，LDH合成分泌增加，从而增加血液浓度，因此重度子痫前期不良妊娠结局患者的LDH水平比良好妊娠结局患者的更高[19-20]。另有研究显示，胎盘组织中的胎盘 MMP-9 水平会随疾病的进展降低[21]，即重度子痫前期组显著低于轻度子痫前期组，MMP-9水平降低会影响滋养细胞的侵入能力，容易造成胎盘损伤，从而导致不良妊娠结局的发生。而本研究测得不良妊娠结局组血清中MMP-9水平显著低于良好妊娠结局组，说明孕妇血清MMP-9水平降低及在胎盘组织的表达下降可能是通过同一种途径参与子痫前期的病理生理过程，从而导致不良妊娠结局的发生。本研究中，血清MMP-9、PLGF联合LDH对重度子痫前期不良妊娠结局的预测价值说明MMP-9和PLGF为重度子痫前期不良妊娠结局患者的单一预测指标，MMP-9、PLGF联合LDH对重度子痫前期不良妊娠结局的预测价值更高。

综上所述，产妇母体血清MMP-9、PLGF能够作为重度子痫前期的不良结局预测因素，MMP-9、PLGF联合LDH对重度子痫前期不良妊娠结局的预测价值更高，可预测患者的妊娠结局，为临床诊断与治疗提供参考。