【摘要】【目的】为了研究蜂王浆的抗衰老作用及其作用机理，【方法】450mg/mL的D-半乳糖以0.3mg/g体重对小鼠颈背部皮下注射，建立衰老模型。对各组实验小鼠连续灌胃4周后，每组中的10只用无水乙醚麻醉，眼球取血，用生理盐水做肝脏匀浆，分别测定小鼠体重，肝重和脾重，血清和肝脏中的SOD、MDA、GSH-PX和NO。每组剩余的10只用于耐缺氧试验。【结果】蜂王浆能显著增加衰老小鼠的体重和脾重，降低肝重，提高衰老小鼠血清和组织中SOD和GSH-PX活性，降低MDA和NO含量水平，延长衰老小鼠的耐缺氧时间，从而达到延缓衰老的目的。【结论】蜂王浆具有抗衰老作用。
【关键词】蜂王浆；半乳糖；抗衰老 ；
【中图分类号】R494 【文献标识码】A【文章编号】2095-6851（2014）10 蜂王浆是青年工蜂咽下腺和上额腺的乳白色分泌物，用于培育幼虫[1]。蜂王浆的化学成分极其复杂，随季节或地区变化，通常含有多种蛋白质，氨基酸，有机酸，类固醇，酯类，酚类，糖类，矿物质，微量元素和其他成分。其中水分约占 62.5 %～70.0 %，蛋白质含量约为12.0 %，脂类物质约为6.0 %，碳水化合物约为l3.0 %，矿物元素约为1.0 %，未确定物（R物质）的含量约为3.0 %[2]。所含蛋白质绝大部分是利于人体吸收和利用的清蛋白和球蛋白。
蜂王浆的药理作用非常广泛，主要表现为抗肿瘤[3]、抗辐射[4]、促细胞生长[5]、免疫调节、提高繁殖率、降血压等功能。减少或延缓与年龄有关的疾病治疗或预防是医学界的热点问题。衰老是由很多因素共同作用的结果，目前所提出的诸如细胞衰老的端粒学说、氧化自由基学说和DNA损伤学说等，均不能解释所有的衰老现象。本文将利用衰老小鼠模型研究蜂王浆的抗衰老作用和相关的作用机理。
一、 材料和方法
1.1 实验材料
普通级KM小鼠：雌雄各半，体重20±2g，购自福建医科大学吴氏实验动物中心。蜂王浆（油菜）由福建省神蜂科技开发有限公司提供。D-半乳糖、氯化钠购自国药集团化学试剂有限公司。实验用试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。
1.2 实验方法
KM小鼠160只，每组20只，饲养在12h光/暗交替，温度为20±2℃的环境中，小鼠自由饮食和饮水。适应饲养1周后，随机选取20只作为正常对照组。取4.5g D-半乳糖溶于无菌的生理盐水（0.9%的氯化钠配制）中，定容至100ml，对小鼠颈背部皮下注射，剂量为0.3mg/g体重。4周后，禁食12 h，观察其活动状态并称体重，测定SOD和MDA指标，以确定动物模型是否成功。
建模成功后的衰老动物模型的140只小鼠随机分为7组，每组20只。正常对照组和模型对照组（灌胃生理盐水），牛血清白蛋白对照组（BSA，1g/kg），蜂王浆组（I-V组）分别灌胃蜂王浆1.05g/kg、2.1 g/kg、3.15 g/kg、4.2 g/kg、5.25 g/kg。连续饲喂4周，在饲喂期间，小鼠自由饮食和饮水。
8周后，每组取10只，禁食12h，称重，乙醚麻醉小鼠，眼球取血，3000rpm下离心20min得到血清，4℃下保存待用。测定SOD、MDA、GSH-PX、NO等生化指标。采血后处死，取小鼠的脾脏和肝脏，用生理盐水清洗后滤纸吸干，称重。
每组其余的10只小鼠，饲喂后30分钟，放入耐缺氧瓶中（先放入6g钠石灰，以吸收瓶中的二氧化碳和水分），先将小鼠在瓶中适应一段时间后密闭耐缺氧瓶，开始计时至瓶中的小鼠完全不动后30秒，作为小鼠的耐缺氧时间。
1.3 统计分析
数据都表示为平均值±标准误。结果数据的统计分析应用SPSS v17.0软件，组间均数差异采用LSD检验。
三、讨论
蜂王浆能够显著的升高衰老小鼠血清和组织中的SOD和GSH-PX的活性，降低血清和组织中的NO和MDA的含量水平，可以增加衰老小鼠的体重和脾重，减轻肝重。显著的延长衰老小鼠的耐缺氧时间。防止由于自由基的产生或其他的因素引起的机体衰老，降低由衰老引起的一些生理和病理性的疾病。
人类无法避免衰老，但是在一定程度上可以延缓衰老。蜂王浆作为一种天然营养物质，成分丰富，含有很多人体所必须的物质。本实验结果显表明蜂王浆具有抗衰老的作用，确定蜂王浆中哪一种活性组分或几种组分在蜂王浆抗衰老中起作用，有待进一步研究。
参考文献
[1]Isidorov V.A.， Czyzewska U.， Jankowska， E.， Bakier， S. Determination of royal jelly acids in honey. Food Chemistry， 2011， 124， 387–391.
[2] Shougo T， Toru K， et al. Estimation and characterisation of major royal jelly proteins obtained from the honeybee Apis merifera [J]. Food Chemistry， 2009， 114： 1491-1497.
[3]黄强， 徐庚达. 10-羟基-2-癸烯酸抗裸小鼠人脑胶质瘤活性的初步研究[J]. 中国神经精神疾病， 1986， 12（1）： 24- 27.
[4]刘务生， 肖显华. 王浆对小鼠辐射损伤治疗作用的实验研究[J]. 中华放射医学与防护杂志， 1984， 4（3）： 25- 26.
[5]Guo-Yan WANG， Zhi-Bin LIN. Effets of 10-hydroxy-2-decenoic acid on phagoytosis and cytokines production of perito
